一、服務(wù)簡介

      JC-1是一種碳氰化合物類陽離子熒光染料，可作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-1在細(xì)胞內(nèi)以聚合體和單體兩種不同的物理形式存在，分別處于不同的熒光發(fā)射峰。當(dāng)JC-1 濃度低或膜電位水平低時(shí)，主要以單體形式存在，激發(fā)波長為527nm，呈綠色熒光；當(dāng)JC-1濃度升高或線粒體膜電位水平較高時(shí)，形成聚合物，發(fā)出紅色的熒光，激發(fā)波長為590nm。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，線粒體跨膜電位被去極化，JC-1從線粒體內(nèi)釋放，紅光強(qiáng)度減弱，以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光，根椐這一特征就可以檢測線粒體膜電位的變化。

      線粒體膜電位檢測試劑盒（JC-1）是一種以JC-1 為熒光探針，快速靈敏地檢測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒，可以用于早期的細(xì)胞凋亡檢測。

二、技術(shù)流程

1、細(xì)胞重懸于0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。；

2、用適當(dāng)?shù)姆椒ㄕT導(dǎo)細(xì)胞凋亡，同時(shí)設(shè)立陰性依照組合陽性對照組，收集細(xì)

胞；

3、用PBS洗滌細(xì)胞三次，收集不多于1×106的細(xì)胞；

4、加入0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中37℃孵育20 

分鐘。

5、在孵育期間，按照每1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入4mL 蒸餾水

的比例配制適量JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。

6、37℃孵育結(jié)束后，600g 4℃離心3～4 min，沉淀細(xì)胞棄上清，注意盡量不

要吸除細(xì)胞。

7、用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌2 次：加入1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重

懸細(xì)胞，600g 4℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入1mL JC-1 染

色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g4℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。

再用適量JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用流式細(xì)胞儀分析。   

三、服務(wù)說明

1、檢測細(xì)胞株（若實(shí)驗(yàn)室有，可共享）。

2、待測毒性藥物（根據(jù)實(shí)驗(yàn)方案有無）。

3、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案或參考文獻(xiàn)。

4、flowjo原文件

五、詢價(jià)及訂購

感謝您選擇我公司的JC-1細(xì)胞線粒體膜電位檢測服務(wù)。如有相關(guān)問題請聯(lián)系我們的工作人員。